糖原PAS過(guò)碘酸雪夫染色試劑盒說(shuō)明書

    一、糖原PAS過(guò)碘酸雪夫染色試劑盒簡(jiǎn)介

    糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年zui先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖，該染色液不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)，以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。

    過(guò)碘酸（又稱高碘酸）是一種強(qiáng)氧化劑，它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1，2-乙二醇基，使之變?yōu)槎?，醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物，產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)，使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間，使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基，又不至于過(guò)氧化，這是很關(guān)鍵的步驟。

    本糖原PAS染色試劑盒的特點(diǎn):采用Leagene*配方技術(shù)，大大增強(qiáng)了染色效果；性能穩(wěn)定，特異性強(qiáng)；操作簡(jiǎn)捷，僅需1h左右。

    二、糖原PAS過(guò)碘酸雪夫染色試劑盒組成

    試劑(A):過(guò)碘酸溶液50ml100ml500ml4℃避光

    試劑(B):SchiffReagent50ml100ml500ml4℃避光

    試劑(C):Lillie-Mayer蘇木素染色液50ml100ml500mlRT避光

    試劑(D):酸性乙醇分化液50ml100ml500ml

    三、糖原PAS過(guò)碘酸雪夫染色試劑盒主要成分：

    試劑(A):主要由過(guò)碘酸等組成。

    試劑(B):主要由堿性品紅、偏重亞硫酸鈉等組成。

    試劑(C):主要由蘇木素、乙醇等組成。

    試劑(D):主要由稀酸、乙醇等組成。

    自備材料：

    1、10%的福爾馬林

    蒸餾水或去離子水

    3、95%乙醇

    4、無(wú)水乙醇

    5、封片劑

    四、糖原PAS過(guò)碘酸雪夫染色試劑盒操作步驟（僅供參考）

    1、常規(guī)固定，常采用10%的福爾馬林，常規(guī)脫水包埋。

    2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水；冰凍切片直接入蒸餾水。

    3、自來(lái)水沖洗2～3min，再用蒸餾水浸洗2次。

    4、置于過(guò)碘酸溶液中，室溫放置5～8min，一般不宜超過(guò)10min.

    5、自來(lái)水沖洗1次，再用蒸餾水浸洗2次。

    6、樣本放入SchiffReagent，置于室溫陰暗處，浸染10～20min。

    7、自來(lái)水沖洗10min。

    8、樣本置于Lillie-Mayer蘇木素染色液中，染細(xì)胞核1～2min。

    9、酸性乙醇分化液分化。

    10、自來(lái)水沖洗10～15min后，更換雙蒸水清洗，使其返藍(lán)。

    11、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。

    12、二甲苯透明。

    13、中性樹膠封固。

    五、糖原PAS過(guò)碘酸雪夫染色試劑盒染色結(jié)果：

    PAS反應(yīng)陽(yáng)性物質(zhì)（糖原或多糖）紅色或紫紅色

    細(xì)胞核藍(lán)色

    細(xì)胞質(zhì)深淺不一的紅色

    備注：顏色深淺很大程度上取決于樣品在過(guò)碘酸溶液和SchiffReagent中作用時(shí)間的長(zhǎng)短。

    陰性對(duì)照(可選)：

    1、對(duì)照切片可以用唾液，取唾液片（過(guò)濾后用）處理30～60min后，與其他切片共同入過(guò)碘酸溶液。

    2、對(duì)照片可以淀粉酶，取淀粉酶1g于雙蒸水或PBS(pH5.3)100ml，處理30～60min后，與其他切片共同入過(guò)碘酸溶液。

    3、如果對(duì)照片采用其自身樣本，對(duì)照片不經(jīng)過(guò)碘酸溶液這一步，直接入SchiffReagent。染色結(jié)果：對(duì)照片呈陰性反應(yīng)，無(wú)紫紅色顆粒。

    六、注意事項(xiàng)：

    1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈，否則影響染色效果。

    2、過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久，氧化時(shí)的溫度以18～22℃zuijia。

    3、試劑(A)、(B)應(yīng)置于4℃密閉保存，使用時(shí)避免接觸過(guò)多的陽(yáng)光和空氣。使用前，

    提前30min取出恢復(fù)到在室溫后，避光暗處使用。

    4、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液，其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙

    醇分化液的新舊而定，另外分化后自來(lái)水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。

    5、在過(guò)碘酸溶液和SchiffSchiffReagent中作用時(shí)間非常重要，該依據(jù)切片厚薄、組織

    的類別等決定。

    6、本試劑盒常用于常規(guī)組織切片染色，對(duì)于真菌、細(xì)胞、極其薄的切片，建議采購(gòu)糖原PAS染色試劑盒（細(xì)胞真菌）,因?yàn)槠溥^(guò)碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低，不宜過(guò)染。7、冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。

    8、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

    七、有效期：6個(gè)月有效。