【ConA-瓊脂糖凝膠4B】參數(shù)說(shuō)明_適用范圍_作用_使用方法_注意事項(xiàng)等咨訊由上海遠(yuǎn)慕生物介紹，我們所供應(yīng)的瓊脂糖凝膠系列特別多，價(jià)格也很便宜，如有需要，歡迎訂購(gòu)!為了滿(mǎn)足客戶(hù)的需求，我們還配有ELISA試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品，動(dòng)物血清，培養(yǎng)基，抗體，抗原，生化試劑，化學(xué)試劑，生物分子，溶液，實(shí)驗(yàn)耗材及其他試劑銷(xiāo)售。
【ConA-瓊脂糖凝膠4B參數(shù)說(shuō)明】
中文名：ConA-瓊脂糖凝膠4B
英文名：ConA Sepharose 4B
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：25ml、100ml
操作溫度：4-40℃
結(jié)構(gòu)成分：4%交聯(lián)瓊脂糖
配基偶聯(lián)量：40μmol phenyl/ml 凝膠
保存條件：4℃
性狀：白色微球，凝膠狀，保存在20%酒精溶液中
應(yīng)用：疏水層析介質(zhì)，適合含芳香族配體蛋白純化，特別適合單抗的純化等
【ConA-瓊脂糖凝膠4B適用范圍】
ConA瓊脂糖凝膠用于各種帶甘露醇及葡萄糖殘基的糖、糖蛋白、糖脂的分離純化。
【ConA-瓊脂糖凝膠4B作用】
ConA-瓊脂糖凝膠4B是將伴刀豆球蛋白(ConA)偶聯(lián)到交聯(lián)及活化的瓊脂糖凝膠上，該填料具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性。ConA能和各類(lèi)帶甘露醇及葡萄糖殘基的糖、糖蛋白、糖脂，所以ConA瓊脂糖凝膠可以用于這類(lèi)物質(zhì)的分離純化。
【ConA-瓊脂糖凝膠4B6FF使用方法】
1、乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí)，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無(wú)鹽水洗去殘存的乙醇濾干。
2、無(wú)鹽水浸泡：室溫下，在無(wú)鹽水中充分溶脹24小時(shí)，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹。
3、鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時(shí)，間隙攪拌，濾干，水洗只中性。
4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層。
5、上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。
6、膠過(guò)濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過(guò)高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時(shí)高徑比為5：1即可。
7、洗脫方法：可以用無(wú)鹽水，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。
8、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。
【ConA-瓊脂糖凝膠4B注意事項(xiàng)】
1、該凝膠從冷室或冰箱中取出后在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫，然后再裝柱，以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
2、吸附：10-30Tris-HCl緩沖液，pH7.5，其中含有0.2MNaCl，2mMMnCl2，2mMCaCl2。平衡10個(gè)柱子床體積。
3、洗脫：可以用pH4.5-6的緩沖液洗脫，也可以用100-500mM糖類(lèi)競(jìng)爭(zhēng)線性或階段洗脫，例如用甲基葡萄糖等甲基吡喃糖，其中緩沖液可以是10-30Tris-HCl緩沖液，pH7.5，含有0.2MNaCl.洗脫zui多可以到10個(gè)柱床體積。
4、上樣樣品必須與平衡柱子的緩沖液pH、電導(dǎo)相同。
5、ConA瓊脂糖凝膠FF親和填料的再生處理方法：先用0.1MTris-HClpH8.5緩沖液洗含0.2MNaCl洗10個(gè)柱床體積，然后用20mM醋酸緩沖液，pH4.5洗3個(gè)床體積,zui后用20%乙醇洗3個(gè)床體積即可。
6、對(duì)于吸附力強(qiáng)的物質(zhì)可以用0.1M硼酸鹽緩沖液，pH6.5低流速洗3-5個(gè)柱床體積。也可以用乙醇線性洗脫20-50%。
7、該親和填料保存條件為20%乙醇，+4~8℃。
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