大腸桿菌作為外源基因表達的宿主,遺傳背景清楚,技術(shù)操作簡單,培養(yǎng)條件簡單,大規(guī)模發(fā)酵經(jīng)濟,倍受遺傳工程專家的重視.目前大腸桿菌是應用蕞廣泛,最成功的表達體系,常做高效表達的shou選體系。

　　真核基因在大腸桿菌中表達,必須有合適的表達載體(Vector),常用載體:pBV220,pET系統(tǒng)

　　目的基因在大腸桿菌中表達的情況:

　　大腸桿菌更適合原核基因的表達,外源基因表達產(chǎn)量與單位體積產(chǎn)量是正相相關(guān)的,而單位體積產(chǎn)量與細胞濃度和每個細胞平均表達產(chǎn)量呈正相相關(guān).細胞濃度與生長速率,外源基因拷貝數(shù)和表達 產(chǎn)物產(chǎn)量之間存在動態(tài)平衡,單個細胞的產(chǎn)量又與外源基因拷貝數(shù),基因表達效率,表達產(chǎn)物的穩(wěn)定性和細胞代謝負荷等因素有關(guān)。

　　大腸桿菌的生化特性簡介

　　大腸桿菌的生化代謝非?；钴S。大腸桿菌可以發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，個別菌株不產(chǎn)氣，大腸桿菌還能發(fā)酵多種碳水化合物，也可以利用多種有機酸鹽。大腸桿菌在常用的生化特性檢測項目中，甲基紅試驗呈陽性，吲哚產(chǎn)生和乳糖發(fā)酵是陽性（個別菌株表現(xiàn)陰性），維-培試驗是陰性，尿素酶和檸檬酸鹽利用呈陰性（極個別菌株表現(xiàn)陽性），硝酸鹽還原試驗表現(xiàn)陽性，氧化酶表現(xiàn)陰性，氧化-發(fā)酵試驗表現(xiàn)為F型。