糖發(fā)酵試驗(yàn)是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)，在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們?cè)诜纸馓穷愇镔|(zhì)的能力上有很大的差異。有些細(xì)菌能分解某種糖產(chǎn)生有機(jī)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫氣、甲烷、二氧化碳等)；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

不同的細(xì)菌可根據(jù)分解利用糖能力的差異表現(xiàn)出是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作為鑒定菌種的依據(jù)。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；傷寒桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不能分解乳糖。發(fā)酵培養(yǎng)基含有蛋白胨，指示劑(溴甲酚紫)，倒置的德漢氏小管和不同的糖類。當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí)，溴甲酚紫指示劑可由紫色(pH6.8)變?yōu)辄S色(pH5.2)。氣體的產(chǎn)生可由倒置的德漢氏小管中有無(wú)氣泡來(lái)證明。
 

糖發(fā)酵試驗(yàn)通常采用試管、德漢氏小管、試管架及各種糖類試劑等多種試劑和耗材，操作繁瑣，耗時(shí)較長(zhǎng)。如何能夠簡(jiǎn)便試驗(yàn)流程，節(jié)省時(shí)間呢？近年來(lái)，HiMedia公司的生產(chǎn)的糖發(fā)酵試劑盒在上悄然流行。

該試劑盒含35項(xiàng)糖發(fā)酵檢查，其中A盒和B盒各含12項(xiàng)糖發(fā)酵試驗(yàn)，C盒含11項(xiàng)糖發(fā)酵試驗(yàn)和1個(gè)對(duì)照試驗(yàn)，通過(guò)微生物發(fā)酵反應(yīng)，培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。

A盒：乳糖、木糖、麥芽糖、果糖、葡萄糖、半乳糖、棉子糖、海藻糖、蜜二糖、蔗糖、L-阿拉伯糖、甘露糖

B盒：菊粉、葡糖酸鈉、甘油、水楊苷、己六醇、肌醇、山梨醇、甘露醇、核糖醇、阿糖醇、赤藻糖醇、-甲基-D-葡萄糖苷

C盒：鼠李糖、纖維二糖、松三糖、α-甲基-D-甘露糖苷、木糖醇、鄰硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)、七葉苷、D-阿拉伯糖、檸檬酸鹽、丙二酸、山梨糖、對(duì)照

待鑒定菌種應(yīng)先進(jìn)行分離和純化?？稍贖iMedia營(yíng)養(yǎng)瓊脂或腦心浸膏瓊脂上挑取一個(gè)菌落，接種在５ml腦心浸膏肉湯中，在35-37℃培養(yǎng)4-6小時(shí)，直到在620nm處，接種液濁度≥0.5OD。一些苛養(yǎng)菌可能需要孵育超過(guò)6小時(shí)，以保證接種液濁度達(dá)到0.5OD。

無(wú)菌打開試劑盒，撕掉封條。每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環(huán)劃線。在35±2℃孵育18-24小時(shí)即可，顯色結(jié)果與《結(jié)果詮釋表》、《菌種標(biāo)準(zhǔn)表》比對(duì)后，從而對(duì)菌種作出鑒定，幾乎包含所有的糖類發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，一次性即可出實(shí)驗(yàn)結(jié)果，方便快