上海遠(yuǎn)慕生物科技是家專(zhuān)業(yè)供應(yīng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商，為您提供人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)，專(zhuān)業(yè)出售酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標(biāo)檢測(cè)試劑盒，染色試劑盒，生化試劑盒，以及培養(yǎng)基，抗體，動(dòng)物血清，標(biāo)準(zhǔn)品，化學(xué)試劑，實(shí)驗(yàn)耗材，細(xì)胞株，其他實(shí)驗(yàn)試劑及實(shí)驗(yàn)品，咨詢(xún)！

    產(chǎn)品中文名：人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA試劑盒

    別名：人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA Kit

    供貨商：上海遠(yuǎn)慕

    規(guī)格：96T/48T

    保存：2-8℃

    試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。

    樣本：血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

    檢測(cè)方法：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。

    檢測(cè)限：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、組織等

    使用范圍：僅供科研使用，不得用于臨床。

    人細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)操作步驟

    1.上海遠(yuǎn)慕標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。請(qǐng)?jiān)诰€索取說(shuō)明書(shū)

    2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

    3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

    4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

    5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

    6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

    7.溫育：操作同3。

    8.洗滌：操作同5。

    9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

    10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

    11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

    操作注意事項(xiàng)：

    （1）實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

    （2）試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

    （3）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

    （4）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

    （5）洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

    （6）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

    （7）加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

    （8）按照雞血紅蛋白（HB）ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

    （9）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

    ELISA試劑盒操作常見(jiàn)問(wèn)題：

    1.邊緣效應(yīng) 使用96孔板的ELISA測(cè)定中，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)"，即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)"，并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。

    2.加樣？在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以，有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性，下次測(cè)定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。

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